авторефераты диссертаций БЕСПЛАТНАЯ РОССИЙСКАЯ БИБЛИОТЕКА - WWW.DISLIB.RU

АВТОРЕФЕРАТЫ, ДИССЕРТАЦИИ, МОНОГРАФИИ, НАУЧНЫЕ СТАТЬИ, КНИГИ

 
<< ГЛАВНАЯ
АГРОИНЖЕНЕРИЯ
АСТРОНОМИЯ
БЕЗОПАСНОСТЬ
БИОЛОГИЯ
ЗЕМЛЯ
ИНФОРМАТИКА
ИСКУССТВОВЕДЕНИЕ
ИСТОРИЯ
КУЛЬТУРОЛОГИЯ
МАШИНОСТРОЕНИЕ
МЕДИЦИНА
МЕТАЛЛУРГИЯ
МЕХАНИКА
ПЕДАГОГИКА
ПОЛИТИКА
ПРИБОРОСТРОЕНИЕ
ПРОДОВОЛЬСТВИЕ
ПСИХОЛОГИЯ
РАДИОТЕХНИКА
СЕЛЬСКОЕ ХОЗЯЙСТВО
СОЦИОЛОГИЯ
СТРОИТЕЛЬСТВО
ТЕХНИЧЕСКИЕ НАУКИ
ТРАНСПОРТ
ФАРМАЦЕВТИКА
ФИЗИКА
ФИЗИОЛОГИЯ
ФИЛОЛОГИЯ
ФИЛОСОФИЯ
ХИМИЯ
ЭКОНОМИКА
ЭЛЕКТРОТЕХНИКА
ЭНЕРГЕТИКА
ЮРИСПРУДЕНЦИЯ
ЯЗЫКОЗНАНИЕ
РАЗНОЕ
КОНТАКТЫ

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |

Клинико-экспериментальное обоснование применения интерлейкина-1 для профилактики и терапии поражений при радиационных авариях

-- [ Страница 3 ] --

Так, однократное внутрибрюшинное введение ИЛ-1 за 72 ч до облучения увеличивало выживаемость мышей практически в 2 раза. Наибольшая эффективность ИЛ-1, как средства профилактики острого радиационного поражения, отмечена при его введении за 24 ч до облучения. В этом случае удавалось обеспечить выживаемость 80 % животных, облученных в дозе СД70/30, а «процент защиты» составил 50% по сравнению с контрольной группой. Применение препарата в качестве средства профилактики радиационного поражения приводило и к увеличению средней продолжительности жизни погибших мышей, в среднем на 5,3 – 5,8 сут.

Применение ИЛ-1 через 1 ч после облучения также приводило к повышению выживаемости на 40 % и увеличению на 4,2 сут средней продолжительности жизни облученных животных. Введение препарата через 24 ч после облучения обеспечивало увеличение выживаемости облученных животных лишь на 10 %, а его инъекция через 72 ч после облучения, напротив, приводила к снижению выживаемости животных на 20 %.

В результате исследований, выполненных на следующем этапе, было установлено, что лечебно-профилактическая эффективность ИЛ-1, оцененная по критериям выживаемости облученных животных, проявлялась при различных вариантах радиационного воздействия: остром и пролонгированном внешнем облучении, при сочетанном внешнем и внутреннем облучении от инкорпорации радионуклидов, характерных для раннего периода радиационной аварии.

Наибольшую радиозащитную эффективность препарат проявлял в условиях острого -облучения с мощностью дозы 130 р/мин (рис. 1).

 Выживаемость белых беспородных-0

Рис. 1. Выживаемость белых беспородных мышей-самцов, подвергнутых острому -облучению с мощностью дозы 130 Р/мин, при профилактическом (за 24 ч) и лечебном (через 1 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг, % (n = 10 в каждой группе)

* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

Как видно из данных, представленных на рисунке 1, после облучения в дозе 5,5 Гр выживаемость животных при профилактическом применении ИЛ-1 увеличивалась на 16,7 %, при его использовании в качестве средства ранней терапии радиационных поражений – на 5,6 %. Прирост выживаемости облученных в дозе 6,0 Гр животных составил 27,8 % при применении ИЛ-1 в качестве радиопротектора и 5,5 % при его использовании с лечебной целью.

Радиопротекторный эффект препарата при облучении мышей в дозах 6,5; 7,0 и 7,5 Гр проявлялся в увеличении выживаемости более чем на 20 % (рис. 1). Лечебная эффективность ИЛ-1 была особенно высока при радиационном воздействии в дозах СД70-90/30: выживаемость животных при облучении в дозе 7,0 Гр увеличивалась в 2 раза, а при облучении в дозе 7,5 Гр – в 4 раза. Расчетное значение ФИД препарата при его применении в качестве радиопротектора составило 1,18, а при использовании ИЛ-1 в качестве средства ранней патогенетической терапии радиационных поражений – 1,16.

Рекомбинантный ИЛ-1 обладал противолучевыми свойствами при профилактическом и при раннем лечебном применении и в условиях однократного рентгеновского воздействия с мощностью дозы 54 Р/мин.

 Выживаемость белых беспородных-1

Рис. 2. Выживаемость белых беспородных мышей-самцов, подвергнутых острому рентгеновскому облучению с мощностью дозы 54 Р/мин, при профилактическом (за 24 ч) и раннем лечебном (через 1 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг, % (n = 20 в каждой опытной группе, n = 40 в каждой контрольной группе)

* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

Как видно из данных, представленных на рисунке 2, при облучении в дозе 5,5 Гр гибель животных контрольной группы составила 80 %, а применение ИЛ-1 с профилактическими или лечебными целями позволяло увеличить выживаемость облученных животных до 90 %. Введение препарата за 24 ч до облучения в дозе 6,5 Гр увеличивало выживаемость мышей на 17,5 %, а его использование через 1 ч после радиационного воздействия защищало от лучевой гибели на 7,5 % больше животных, чем в контроле. При облучении в дозе 7,5 Гр профилактическое применение препарата позволяло спасти от лучевой гибели почти в 3 раза больше животных, а эффективность его лечебного использования проявлялась в 2-х кратном увеличении выживаемости. При облучении в дозе 8,5 Гр выживаемость в контроле составила 2,5 %, в то время как при использовании ИЛ-1 за 24 ч до радиационного воздействия – в 8 раз больше, а при его применении через 1 ч после облучения – в 6 раз больше, чем в контроле. Расчетное значение ФИД при дозах СД50/30 составило 1,20 для радиопротекторного эффекта препарата и 1,18 для его лечебной активности.

Результаты оценки радиозащитной эффективности ИЛ-1 в условиях пролонгированного -облучения представлены в таблице 2.

Таблица 2

Выживаемость (%) и средняя продолжительность жизни (сут) белых беспородных крыс, подвергнутых внешнему -облучению в дозе 10 Гр с мощностью дозы 1 Р/мин, при профилактическом (за 24 ч) и раннем лечебном (через 1 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 1 мкг/кг (n = 10 в каждой группе)

Показатель Группы
контроль (облучение) ИЛ-1 за 24 ч до облучения ИЛ-1 через 1 ч после облучения
Выживаемость, % 30 ± 10 90 ± 20* 80 ± 20*
СПЖ, сут 16,0 ± 1,6 25,0 ± 1,2* 27,5 ± 1,2*
* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

Установлено, что в условиях пролонгированного -облучения с мощностью дозы 1 Р/мин применение ИЛ-1 за 24 часа до облучения позволяет увеличить выживаемость облученных крыс в 3 раза, а при использовании препарата через 1 ч после лучевого воздействия – в 2,6 раза. Кроме того, при профилактическом применении ИЛ-1 средняя продолжительность жизни погибших животных возрастала на 8,4 сут, а при лечебном – на 10,9 сут.

Как видно из данных, представленных на рисунке 3, в условиях сочетанного радиационного воздействия гибель животных контрольной группы составила 70 %, а средняя продолжительность жизни погибших крыс 19,6 ± 2,1 сут. Профилактическое применение ИЛ-1 на 40 % снижало показатели смертности облученных животных и на 8 сут увеличивало среднюю продолжительность жизни погибших от радиационной травмы крыс. Еще более эффективным было использование ИЛ-1 в качестве средства ранней терапии: выживаемость облученных животных увеличивалась на 50 %, а средняя продолжительность жизни погибших особей возрастала на 8,4 сут.

 Выживаемость (%) и средняя-2

Рис. 3. Выживаемость (%) и средняя продолжительность жизни (сут) белых беспородных крыс-самцов, подвергнутых сочетанному внешнему и внутреннему облучению в дозе 10 Зв, при профилактическом (за 24 ч) и раннем лечебном (через 1 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 1 мкг/кг (n = 10 в каждой группе)

* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

Таким образом, данные экспериментальных исследований свидетельствуют о том, что рекомбинантный ИЛ-1 может рассматриваться в качестве эффективного средства профилактики и ранней терапии лучевых поражений, развивающихся при различных вариантах радиационного воздействия (внешнее острое и пролонгированное, сочетанное внешнее и внутреннее облучение).

Влияние интерлейкина-1 на показатели костномозгового кроветворения у мышей при внешнем - и рентгеновском облучении

На данном этапе исследования в методиках эндогенного и экзогенного колониеобразования изучалось влияние профилактического и раннего лечебного применения ИЛ-1 на число стволовых кроветворных клеток, определяющих возможность восстановления гемопоэза после облучения.

Эксперимент проводили на 400 белых беспородных мышах-самцах, 200 из которых относились к опытным группам (профилактическое и лечебное применение ИЛ-1) и 200 – к контрольным группам (облучение без применения исследуемого препарата). Животных опытных и контрольных групп подвергали внешнему рентгеновскому облучению на установке РУМ-17 в дозах 5,5 (n = 10), 6,0 (n = 10), 6,5 (n = 12), 7,0 (n = 14), 7,5 (n = 16), 8,0 (n = 18) и 8,5 Гр (n = 20).

В результате проведенных исследований установлено, что рекомби-нантный ИЛ-1 обладает радиопротекторной и ранней терапевтической активностью в отношении клеток-предшественников гемопоэза у облученных мышей (табл. 3).

Таблица 3

Количество эндогенных 9-суточных колониеобразующих единиц на селезенке белых беспородных мышей-самцов, подвергнутых внешнему однократному рентгеновскому облучению, при профилактическом (за 24 ч) и лечебном (через 1 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг (n = 10 в каждой группе)

Доза облучения, Гр Контроль (облучение) ИЛ-1 за 24 ч до облучения ИЛ-1 через 1 ч после облучения
5,5 7,3 ± 1,7 10,8 ± 2,4 11,0 ± 1,6
6,0 5,8 ± 1,1 6,0 ± 1,8 8,3 ± 1,1
6,5 4,6 ± 0,9 5,5 ± 0,8 6,7 ± 0,8
7,0 3,1 ± 0,7 5,3 ± 1,2 * 6,0 ± 0,7 *
7,5 1,8 ± 0,6 3,2 ± 0,7 * 5,6 ± 1,1 *
8,0 0,8 ± 0,5 2,2 ± 1,2* 3,8 ± 0,9 *
8,5 0 2,0 ± 1,0* 1,7 ± 0,6*
* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)

В условиях профилактического (за 24 ч до радиационного воздействия) применения при всех изученных дозах облучения рекомбинантный ИЛ-1 предотвращал снижение количества эндогенных КОЕ-С9 у облученных мышей. Статистически значимых отличий по сравнению с контролем (радиационным воздействием без предварительного введения рекомбинантного ИЛ-1) данный показатель достигал при облучении животных в дозах 7,0 и 7,5 Гр (СД70-80/30). При действии очень высоких доз – 8,5 Гр (СД90-100/30) – только предварительное внутрибрюшинное введение препарата позволяло сохранить колониеобразующую активность клеток на селезенках облученных мышей.

Высокую противолучевую активность по показателям эндогенного колониеобразования ИЛ-1 проявлял и при его лечебном применении через 1 ч после радиационного воздействия (табл. 3). И в этом случае при всех дозах облучения рекомбинантный ИЛ-1 предотвращал снижение числа эндогенных КОЕ-С9 у облученных мышей. Так, число КОЕ-С9 при лечебном применении препарата превышало аналогичные значения группы сравнения при облучении в дозе 7,0 Гр почти в 1,5 раза, при облучении в дозе 7,5 Гр – в 2,6 раза, при облучении в дозе 8,0 Гр – в 4,75 раза. Следует также отметить, что, как и в случае профилактического использования ИЛ-1, только его лечебное применение позволяло обнаружить рост эндогенных колоний на селезенках мышей, подвергнутых радиационному воздействию в дозе 8,5 Гр.

Влияние профилактического (за 24 ч до облучения) введения рекомбинантного ИЛ-1 в дозе 50 мкг/кг на количество КОЕ-С9 у облученных мышей изучали и в методике экзогенного колониеобразования. Эксперимент проводился на мышах различных линий: мышах линии BALB/c, обладающих высокой радиочувствительностью, белых беспородных мышах и мышах-гибридах первого поколения CBA x C57Bl, являющихся радиорезистентными.

Результаты проведенного исследования представлены в таблице 4.

Таблица 4

Число миелокариоцитов и количество экзогенных 9-суточных колониеобразующих единиц на селезенке мышей, подвергнутых внешнему однократному рентгеновскому облучению, при профилактическом (за 24 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг (n = 20 в каждой группе)

Лабораторные животные Показатель Условия эксперимента
без облучения контроль (облучение) ИЛ-1 за 24 ч до облучения ИЛ-1 без облучения
Мыши линии BALB/c число миелокариоцитов, x 106/бедро 18,5 ± 1,6 18,2 ± 1,4 18,5 ± 1,2 18,0 ± 1,5
число КОЕ-С9 в 1 бедре 80 ± 8 11 ± 1 32 ± 3 * 320 ± 34 * **
число КОЕ-С9 на 106 миелокариоцитов 4,1 ± 0,5 0,6 ± 0,2 1,7 ± 0,3 * 17,7± 2,0 * **
Белые беспородные мыши число миелокариоцитов, x 106/бедро 18,0 ± 1,5 18,4 ± 1,4 20,0 ± 1,2 18,4 ± 1,6
число КОЕ-С9 в 1 бедре 220 ± 56 80 ± 32 164 ± 29 * 400 ± 94 *
число КОЕ-С9 на 106 миелокариоцитов 24,4 ± 6,1 8,7 ± 3,2 15,4 ± 3,0 * 43,4 ± 9,9 *
Мыши-гибриды первого поколения CBA x C57B1 число миелокариоцитов, x 106/бедро 21,0 ± 1,8 20,5 ± 1,4 20,0 ± 1,9 19,3 ± 1,6
число КОЕ-С9 в 1 бедре 358 ± 19 38 ± 8 107 ± 12 * 404 ± 21 *
число КОЕ-С9 на 106 миелокариоцитов 18,0 ± 1,1 1,2 ± 0,2 5,2 ± 0,3 * 22,5 ± 0,2 *
* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением) ** – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с уровнем до облучения

Установлено, что радиационное воздействие вызывало существенное снижение количества колоний, выросших на селезенках облученных животных: до 15 % от исходного уровня у мышей линии BALB/c, до 36 % – у белых беспородных и до 10 % – у гибридов F1 (CBA x C57Bl).

Профилактическое (за 24 ч до облучения) внутрибрюшинное введение рекомбинантного ИЛ-1 в дозе 50 мкг/кг позволяло в значительной степени предотвратить постлучевое снижение числа экзогенных КОЕ-С9 у облученных мышей. При этом, радиозащитный эффект препарата в отношении клеток-предшественников проявлялся вне зависимости от радиочувствительности различных линий мышей. Число колоний на селезенках облученных животных под влиянием препарата в среднем увеличивалось в 2-3 раза. Так, у мышей линии BALB/c, получавших ИЛ-1 в качестве радиопротектора, количество колоний, по сравнению с незащищенными облученными животными, выросло в 2,8 раза и составило 42 % от уровня облученного контроля. У белых беспородных мышей число колоний выросло в 1,8 раз (до 63 % от уровня облученного контроля), у мышей-гибридов – в 4,3 раза (до 29 % от уровня облученного контроля).

Таким образом, результаты исследований показали, что рекомбинантный ИЛ-1 влияет на миграционную и пролиферативную активность ранних предшественников гемопоэза, увеличивая ее. Применение данного препарата за 24 ч до облучения или через 1 ч после радиационного воздействия способствует сохранению жизнеспособности значительного числа кроветворных клеток-предшественников гемопоэза, о чем свидетельствуют данные, полученные при исследовании противолучевой эффективности ИЛ-1 в методиках эндогенного и экзогенного колониеобразования.

Влияние интерлейкина-1 на количественный состав лейкоцитов периферической крови облученных мышей и крыс

На данном этапе исследования в экспериментах на 120 белых беспородных мышах-самцах проводили изучение влияния ИЛ-1 на пострадиационную динамику содержания лейкоцитов в периферической крови. Животных подвергали внешнему относительно равномерному однократному -облучению в дозе 6 Гр (СД70/30) с мощностью дозы 130 Р/мин.

Как видно из данных, представленных в таблице 5, острое -облучение в дозе 6 Гр вызывало у мышей развитие панцитопении с выраженными проявлениями миелодепрессии. Введение ИЛ-1 животным до облучения существенно не влияло на темп развития постлучевой лейкопении в 1-е сутки, однако уже к 3-м суткам после облучения у мышей, получавших препарат, общее число лейкоцитов в периферической крови сохранялось на более высоком уровне по сравнению с контролем. Начало восстановления числа лейкоцитов у леченых животных отмечалось через 8 сут после облучения, тогда как в контроле этот процесс развивался лишь к 12 сут (табл. 5).

Таблица 5

Динамика общего числа лейкоцитов в периферической крови белых беспородных мышей, подвергнутых острому -облучению в дозе 6 Гр при профилактическом (за 24 ч) применении интерлейкина-1 в дозе 50 мкг/кг, х 109/л (n = 10 в каждой группе)

Условия эксперимента Сроки исследования, сут
до облучения 1 3 8 12 20
Контроль (облучение) 7,5 ± 0,5 1,2 ± 0,2 0,3 ± 0,2 0,4 ± 0,1 0,7 ± 0,3 7,0 ± 0,5
ИЛ-1 за 24 ч до облучения 9,3 ± 0,4 * 1,3 ± 0,2 0,8 ± 0,1* 1,5± 0,2* 1,8± 0,2* 7,6 ± 0,3
* – различия достоверны (p < 0,05) по сравнению с контролем (облучением)


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |
 








 
© 2013 www.dislib.ru - «Авторефераты диссертаций - бесплатно»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.